АНАЛИЗЫ НА ВПЧ (Вирус папилломы человека)

Что такое ВПЧ (вирусы папилломы человека)

ВПЧ (вирусы папилломы человека, Human papilloma virus, HPV) – многочисленная группа вирусов рода папилломавирусов. Группа насчитывает несколько сотен типов вирусов, все они являются ДНК-содержащими. Генотипы близкородственных генетических вариантов различаются между собой более чем на 10%. ВПЧ могут существовать только в человеческом организме, являются возбудителями папилломавирусной инфекции (ПВИ), которая поражает кожный эпителий или эпителий слизистых оболочек с образованием бородавок, папиллом, плоских и остроконечных кондилом, карцином.

ВПЧ передаются преимущественно половым путем, заражение чаще происходит в юном, молодом возрасте, наиболее уязвимы девушки и женщины возрастной категории 15-30 лет. Другие возможные пути передачи – контактный, контактно-бытовой (при непосредственном соприкосновении с кожей, слизистыми больного и через предметы обихода), вертикальный (от матери ребенку при родах). Микротравмы и потертости кожи, слизистой, ослабление общего и местного иммунитета повышают вероятность проникновения инфекции в организм. Новообразования, вызванные папилломавирусной инфекцией, могут локализоваться на различных частях тела (половые органы, задний проход, подошвы, ротовая полость, дыхательные пути и пр.), около 40 типов вирусов папилломы являются преимущественно аногенитальными, их еще называют венерическими.

Особенность вирусов папилломы человека в том, что они не проникают в кровоток, а внедряются в незрелые клетки глубоких слоев кожи и слизистых оболочек (чаще всего – базального слоя), повреждают их генетический аппарат. Деление эпителиальных клеток с измененным вирусом геномом приводит к разрастанию новообразований, а в поверхностных слоях эпителия формируются вирусные частицы, которые становятся источником инфекции для контактных лиц. Встраивание некоторых типов вируса в геном клеток сопровождается усиленной продукцией онкобелков Е6, Е7, такие состояния классифицируются как предраковые. Из пораженных эпителиальных клеток может развиться инвазивный рак, который распространяется за пределы изначально инфицированной структуры.

Риски злокачественного перерождения доброкачественных новообразований выше при иммунодефицитных состояниях, заражении одновременно несколькими типами ВПЧ, наличии в организме других вирусных инфекций и ЗППП любой природы, тяжелых хронических заболеваниях, наличии вредных привычек. В значительной мере риск зависит от степени онкогенности (канцерогенности) штамма. По этому критерию ВПЧ подразделяют на 4 группы:

• неонкогенные, 1-5;
• низкого онкогенного риска – 6, 11, 40, 42, 43, 44, 54, 61, 70, 72, 81;
• среднего онкогенного риска – 26, 53;
• высокого онкогенного риска – 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82.

В последней группе максимально опасными считаются типы 16 и 18, с ними связано до 70% случаев рака шейки матки, до 80% – вульвы и влагалища, 92% – анального, 95% – ротовой полости, 89% – ротоглотки, 63% – полового члена.

Основной клинический симптом папилломавирусной инфекции – появление на коже, слизистых оболочках разрастаний различной формы – плоских пятен с гладкой или бархатистой поверхностью, объемных образований на тонкой ножке или с широким основанием, однородных или дольчатого строения (типа цветной капусты, петушиного гребня). Размер, окраска разрастаний также варьируются. Новообразования очень уязвимые, легко травмируются и кровоточат, отекают, воспаляются, создаются благоприятные условия для присоединения вторичной инфекции. Специфические новообразования, вызванные ПВИ, могут локализоваться на скрытых от глаз участках (шейка матки, слизистая гортани), их можно обнаружить только в процессе инструментального обследования. Кроме видимых (экзофитных) разрастаний на поверхности кожных покровов и слизистых оболочек ПВИ может вызывать появление эндофитных новообразований, которые скрыты в толще тканей.

Помимо эпителиальных разрастаний к клиническим проявлениям папилломавирусной инфекции относятся:

• зуд, жжение, нарушения чувствительности в области поражения;
• кровоточивость кожи и слизистых, образование болезненных трещин;
• при аногенитальных бородавках, кондиломах возможна болезненность при половом акте, мочеиспускании, у женщин – бели и кровянистые межменструальные выделения, у мужчин при обширном поражении уретры – затрудненное мочеиспускание;
• при респираторном папилломатозе – осиплость, изменения тембра и силы голоса, затрудненное, свистящее дыхание, лающий кашель. Заболевание может привести к стенозу гортани. Существует риск полной потери голоса, асфиксии вследствие обструкции гортани;
• при злокачественном характере новообразований к специфическим симптомам могут присоединяться боли, слабость, необъяснимая потеря веса.

Некоторые клинические формы папилломавирусной инфекции (латентная, субклиническая) характеризуются бессимптомным течением и могут длиться от нескольких месяцев до нескольких лет, диагностировать их можно только с помощью лабораторных исследований. По данным ВОЗ, распространенность ВПЧ среди молодого населения достигает 80%, но только у 5-10% инфицированных отмечаются клинические проявления. В среднем в 70-80% случаев на протяжении 9-15 месяцев после инфицирования ВПЧ происходит самоизлечение, но инфекция также может перейти в хроническую, рецидивирующую форму, осложниться гнойно-воспалительными и онкологическими процессами, в том числе развитием инвазивных форм рака.

Против наиболее опасных, высокоонкогенных штаммов ВПЧ разработана вакцина, вакцинация позволяет предупредить заражение, но не помогает в лечении уже развившейся ПВИ.

Виды анализов на ВПЧ

Основным методом лабораторной диагностики папилломавирусной инфекции являются ПЦР-исследования, направленные на выявление ДНК вируса папилломы человека в биологическом материале пациента (соскобе, моче). Это единственный метод выявления скрытой инфекции, латентную форму ПВИ невозможно обнаружить при инструментальных, гистологических, цитологических исследованиях.

Гистологические, цитологические исследования и пробы с применением растворов-индикаторов позволяют выявить субклиническую форму инфекции. К цитологическим методам диагностики относятся ПАП тест (мазок по Папаниколау) и цитологическое исследование эпителия шейки матки, цервикального канала на атипичные клетки (мазок на атипию).

ПЦР-исследования, как правило, направлены на выявление 2 и более типов ВПЧ одновременно. В лаборатории Николаб проводятся анализы на:

• типы 6 и 11 (самые распространенные типы вируса низкого онкогенного риска, основные возбудители ПВИ с образованием аногенитальных бородавок, остроконечных кондилом, рецидивирующего респираторного папилломатоза);
• типы 16 и 18 (типы с максимально высоким канцерогенным потенциалом, причина многих форм рака);
• 14 типов ВПЧ с высоким онкогенным риском (типы 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68);
• 28 широко распространенных типов ВПЧ с разной степенью онкогенного риска (66, 45, 58, 51, 59, 16, 33, 39, 52, 35, 18, 56, 68, 31, 26, 69, 73, 42, 82, 53, 43, 54, 70, 61, 6, 44, 40, 11).

ПЦР-исследования на ВПЧ различаются не только качественным и количественным составом анализа (набором типов вируса), но и методом определения вирусной ДНК:

• качественное определение (выявление) без определения типа – скрининговое исследование, которое позволяет подтвердить или исключить наличие в исследуемом материале ДНК хотя бы одного из тех типов ВПЧ, которые входят в состав конкретного анализа. Этим методом в лаборатории Николаб проводятся анализы на выявление 6/11, 16/18 типов и 14 типов с высоким онкогенным риском;
• количественное определение ДНК – если в образце выявлен генетический материал вируса, дается количественная оценка его концентрации (количества копий ДНК). Анализ проводится в отношении 16/18 типов, 14-ти и 28-ми типов вируса;
• качественное определение ДНК с генотипированием – позволяет установить тип каждой выявленной разновидности вируса. Проводится в отношении 14 типов вируса с высоким онкогенным риском.

В лаборатории Николаб для ПЦР-исследования используются урогенитальный соскоб, моча.

В каких случаях назначаются анализы на ВПЧ

Различные анализы на ВПЧ могут назначаться:

• при наличии бородавок, папиллом, кондилом, морфологических изменений эпителия и других клинических симптомов папилломавирусной инфекции;
• при скрининге рака шейки матки (ПЦР-исследование с качественным определением ДНК в комплексе с цитологическим исследованием) у женщин старше 30 лет;
• при планировании вакцинации от ВПЧ и после ее проведения;
• лицам, у которых выявлена ПВИ в латентной, субклинической форме;
• после лечения папилломавирусной инфекции.

Цитологические исследования проводятся преимущественно в скрининговых целях, для ранней диагностики рака шейки матки и предраковых состояний. Также могут назначаться для мониторинга пациенток с выявленной методом ПЦР латентной папилломавирусной инфекцией. Цели проведения ПЦР-исследований более широкие:

• выявление латентной инфекции, разработка плана динамического наблюдения;
• подтверждение, уточнение результатов цитологического, гистологического исследования при субклинической форме инфекции;
• прогноз риска развития ВПЧ-ассоциированных злокачественных новообразований, прежде всего, тяжелой дисплазии и рака шейки матки;
• динамический мониторинг пациентов с выявленной латентной или субклинической инфекцией, контроль персистирования вируса;
• разработка схемы лечения и оценка его эффективности;
• оценка целесообразности проведения вакцинации от ВПЧ и ее эффективности.

В скрининговых целях (чтоб подтвердить или опровергнуть наличие в организме вирусов определенной группы – низкого/высокого/ максимально высокого онкогенного риска) назначаются анализы с качественным определением ДНК. Анализы с количественным определением ДНК и с генотипированием назначаются только при положительных результатах скрининговых исследований. Они же применяются для наблюдения в динамике. Количественное определение ДНК позволяет оценить вирусную нагрузку, степень риска наличия или развития предраковых состояний, рака. Генотипирование также важно для оценки риска – при выявлении ДНК сразу нескольких генотипов или наиболее опасных типов вируса (16 и/или 18) риск выше. При мониторинге генотипирование позволяет отличить персистирование (хроническую инфекцию, которая более опасна) от реинфицирования другим вирусом/набором вирусов.

Преимущества анализов на ВПЧ в лаборатории Николаб

В лаборатории Николаб проводится широкий перечень ПЦР-исследований, которые являются специфичным и высокочувствительным методом диагностики и скрининга папилломавирусной инфекции. В зависимости от показаний (скрининг, положительные результаты цитологических исследований, наличие клинических симптомов) можно выбрать наиболее целесообразный вид анализа с оптимальным соотношением информативности и цены. Также лаборатория проводит цитологические исследования, которые позволяют выявить изменения эпителия экто- и эндоцервикса различной природы, в том числе связанные с ПВИ. Все анализы проводятся с применением высокочувствительного лабораторного оборудования и сертифицированных расходных материалов.

Как подготовиться к сдаче анализов на ВПЧ

Правила подготовки зависят от биологического материала, который исследуется. Любые соскобы (мазки) рекомендуется брать до проведения диагностических, лечебных манипуляций в предполагаемом месте локализации возбудителя.

Урогенитальный соскоб женщинам рекомендуется сдавать в 1 половине менструального цикла, начиная с 5-го дня, допустимо взятие соскоба во 2 половине цикла, минимум за 5 дней до предполагаемого начала очередной менструации. При наличии патологических изменений, которые указывают на рак, предраковое состояние, взятие соскоба осуществляется в день обращения. Следует на протяжении 1-2 суток воздерживаться от спринцеваний влагалища, половых контактов, такой же интервал необходимо выдержать после кольпоскопии, вагинального УЗИ. При взятии мазка из уретры 2-3 часа воздерживаться от мочеиспускания. На мужчин распространяется требование воздерживаться от половых контактов и мочеиспускания.

Сбор мочи осуществляется утром, после тщательного туалета наружных половых органов. За день накануне сдачи анализа рекомендуется исключить из рациона алкоголь, острую и соленую пищу.

Забор материалов для цитологических исследований особой подготовки не требует, женщинам рекомендуется сдавать мазок на атипичные клетки до начала менструации или через 2-3 дня после завершения.