Хелікобактеріоз (Helicobacter pylori), якісне визначення ДНК методом ПЦР (кал)

Хелікобактеріоз є інфекційним захворюванням, спричиненим бактерією Helicobacter pylori, яка переважно колонізує слизову оболонку шлунка. Мікроорганізм унікальний своєю здатністю виживати в екстремально-кислому середовищі шлункового соку завдяки продукції уреази, ферменту, що нейтралізує кислоту. Хелікобактеріоз вважається головною причиною розвитку гастриту, виразкової хвороби шлунка та дванадцятипалої кишки, а також відіграє ключову роль у патогенезі аденокарциноми та лімфоми шлунка.

Опис бактерії

Helicobacter pylori — це вигнута грамнегативна бактерія у формі спіралі, завдовжки близько 2,5–5 мкм. Вона має 4–6 джгутиків, що забезпечують її рухливість у слизовій оболонці шлунка. Бактерія належить до мікроаерофілів, що вимагають низького вмісту кисню для зростання. Її клітинна стінка містить ліпополісахариди, які сприяють імунній відповіді та запаленню. Унікальною особливістю H. pylori є здатність виживати в кислому середовищі шлунка завдяки продукції уреази — ферменту, який розкладає сечовину на аміак та вуглекислий газ, що нейтралізує кислоту навколо бактерії.

Бактерія проникає через слизовий шар шлунка, використовуючи свої джгутики для активного руху. Вона прикріплюється до клітин епітелію та утворює локальне лужне середовище навколо себе, що захищає його від впливу шлункового соку. Здатність бактерії адаптуватися до екстремальних умов робить її одним із найстійкіших патогенів в організмі людини.

Процес прикріплення H. pylori до епітелію шлунка й порушує цілісність слизового шару, що робить тканину більш вразливою до дії соляної кислоти та пепсину. У результаті розвивається хронічний гастрит, ерозії та виразки.

Уперше бактерія була виявлена в ​​1982 році австралійськими вченими Баррі Маршаллом і Робіном Уорреном. Вони визначили її зв’язок із хронічним гастритом та виразковою хворобою, продемонструвавши результати досліджень усьому світу. Це стало революційним відкриттям у гастроентерології. До цього вважалося, що основними причинами виразки є стрес, гостра їжа та кислотність. У результаті досліджень Маршалл самостійно інфікував себе H. pylori, що дало змогу підтвердити її патогенність. За це відкриття у 2005 році вченим було присуджено Нобелівську премію.

Особливості захворювання

H. pylori передається від людини до людини через контакт з інфікованою слиною та випорожненнями (блювотні маси, фекалії). Також можливий аліментарний шлях передачі через вживання забрудненої води або їжі, особливо в регіонах із низьким рівнем гігієни.

Хелікобактеріоз може проявлятися різноманітною симптоматикою, яка варіюється залежно від стадії захворювання та ступеня ушкодження слизової оболонки шлунка. На ранніх етапах часто відзначається біль у верхній частині живота, особливо в епігастрії. Болі можуть бути ниючими, періодичними або пов’язаними з прийомом їжі (після прийому їжі вщухають).

Диспепсія, що включає відчуття важкості після вживання їжі, здуття живота та відрижку, є частою ознакою інфекції. Нерідко пацієнти скаржаться на печію, що виникає через порушення кислотного балансу в шлунку. Нудота, а в деяких випадках блювання, також може супроводжувати хронічний гастрит, спричинений H. pylori.

Згодом, якщо інфекція залишається нелікованою, виявляються ознаки хронічного гастриту. До них належить зниження апетиту, втрата ваги та погіршення загального самопочуття. У разі виразкової хвороби симптоми включають більш виражені болі, які можуть виникати натще і зникати після їжі або приймання антацидів.

Особливості дослідження

Якісний ПЛР при хелікобактеріозі застосовується для виявлення генетичного матеріалу в біологічному зразку, а саме в калі. Тест є високо специфічним та чутливим методом, який дає змогу точно визначити наявність бактерії, навіть якщо в зразку міститься низька кількість мікроорганізмів. Це важливо для раннього виявлення інфекції, особливо у випадках, коли бактеріальне навантаження низьке або присутні інші захворювання зі схожими симптомами.

Використання ПЛР для діагностики H. pylori у калі також допомагає в моніторингу ефективності лікування, оскільки дає змогу відстежувати ерадикацію бактерії після курсу терапії.

Коли та навіщо призначають аналіз

Показання до проведення аналізу:

• симптоми, що потребують діагностики (біль у животі та диспепсичні розлади);
• підозра на виразкову хворобу;
• хронічні захворювання шлунково-кишкового тракту;
• рак шлунка та асоційовані захворювання;
• контроль за ефективністю терапії ерадикації H. pylori;
• контакт із джерелом інфекції;
• профілактичні дослідження в пацієнтів із ризиком розвитку хелікобактеріозу (тривале застосування нестероїдних протизапальних препаратів (НПЗП), алкоголізм та куріння).

Дослідження потрібне для:

• раннього виявлення інфекції;
• постановки точного діагнозу;
• визначення присутності H. pylori з метою уточнення причин виразкового ураження;
• контролю після лікування;
• оцінки ризику розвитку раку;
• проведення дифдіагностики.

Призначають аналіз: інфекціоністи, гастроентерологи, сімейні лікарі, педіатри, терапевти, онкологи.

Правила підготовки

Забір калу для аналізу проводиться в домашніх умовах. Необхідно зібрати матеріал у стерильну ємність, яку можна придбати в аптеці чи відділенні лабораторії Ніколаб. Достатньо здійснити збір за допомогою спеціальної ложечки (йде разом із контейнером) із трьох місць (початку, середини та кінця) загальним обсягом 10–15 грамів.

Перед збором необхідно дотримуватися простих правил підготовки:

• за 2–3 тижні до аналізу припинити приймання антибіотиків;
• за 3 дні відмовитися від нанесення місцевих антисептичних препаратів, приймання препаратів, що впливають на моторику кишківника (наприклад, проносні засоби), використання ректальних свічок, масел;
• за 3 дні не вживати їжу та препарати, які можуть забарвити кал (морква, буряк, газировка, препарати заліза, вісмуту та активоване вугілля).

Перед збиранням калу необхідно провести туалет з використанням нейтрального мила та теплої води. Краще збирати кал безпосередньо перед передачею до лабораторії, щоб доставити його максимум упродовж 2 годин.

Інтерпретація результатів

Позитивний результат на Helicobacter pylori методом ПЛР означає, що в зразку калу виявлено ДНК бактерії. Це говорить про:

• наявність інфекції в шлунково-кишковому тракті;
• розвиток одного із захворювань: гастрит, виразка шлунка або дванадцятипалої кишки;
• підвищений ризик розвитку раку шлунка.

Негативний результат свідчить, що ДНК бактерії в зразку калу не виявлено, але не виключає наявність захворювання шлунка, що пов’язане з іншими патогенами чи іншими причинами. Він також свідчить про ефективність проведеної антибактеріальної терапії.

Важливі примітки

Якщо зразок калу був зібраний неправильно (наприклад, у разі забруднення сечею, водою або іншими сторонніми речовинами), це може призвести до хибнонегативних або хибнопозитивних результатів.

Приймання антибіотиків перед здаванням аналізу знижує кількість бактерій H. pylori у шлунку, а, отже, і в калі. Це призведе до недостатньої концентрації ДНК у зразку, що може вплинути на чутливість тесту. Важливо проконсультуватися з лікарем та призупинити проведення терапії на якийсь час.